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如何在奧林巴斯顯微鏡(CX31)下區(qū)分活細(xì)菌和死細(xì)菌

更新時(shí)間:2015-06-30      瀏覽次數(shù):4604

    可以采用染色法。碘化丙啶是紅色熒光活力染料,結(jié)合DNA。碘化丙啶不能穿透活細(xì)胞和早期凋亡細(xì)胞的細(xì)胞膜,當(dāng)細(xì)胞失去膜的完整性,碘化丙啶可染色DNA,也就是說它可以染死細(xì)胞,這個(gè)是常用的方法。
    Trypan Blue是一種常被使用于細(xì)胞染色的染劑。Trypan Blue無法穿透活細(xì)胞的細(xì)胞膜,但是當(dāng)細(xì)胞受傷或死亡,細(xì)胞膜破損時(shí),Trypan Blue則可以通透細(xì)胞膜進(jìn)入細(xì)胞內(nèi),使細(xì)胞染成藍(lán)黑色。利用此一特點(diǎn),配合血球計(jì)數(shù)器的使用,則可以在奧林巴斯顯微鏡(CX22/CX31/CX41)底下,分辨出細(xì)胞樣本中的活細(xì)胞與死細(xì)胞,以方便細(xì)胞計(jì)數(shù)。
    一般用美藍(lán)與堿性品紅的復(fù)合染料進(jìn)行死菌的區(qū)分。染色后,活菌染為藍(lán)色,死菌和培養(yǎng)基偏紅,在顯微鏡(CX22/CX31/CX41)下很好區(qū)分。堿性品紅用乙醇加熱溶解,過濾,按1:10左右加入,可以根據(jù)情況適當(dāng)調(diào)整到可以區(qū)分活菌和培養(yǎng)基即可。這是發(fā)酵中檢查是否染菌的zui常用方法。
    蘸取含細(xì)菌的液體LB培養(yǎng)基,在奧林巴斯顯微鏡下直接觀察,活菌游動(dòng),而死菌不動(dòng),這是zui簡單的一種粗略的方法,用戶可以試試。

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